08/06/2014
Q&A時間
生物組:探討中草藥萃取物對高糖飲食併發症影響
首先,謝謝大家那麼踴躍貢獻這堆題目,我們感激的五體投地……XDD
我們已盡量完整回答~希望能為你(妳)解惑 J
1. 何謂西方墨點法?又如何進行?
利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息,來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。以下為簡易步驟:
如附圖所示
2. 為何雌果蠅在施用1µM、5µM RV的前數天時會有死亡率上升的情形?
在前幾天中果蠅所食用的藥量並不多,死亡不一定是藥物所造成的。而且每一次的實驗在前幾天其實都可能會有1、2隻果蠅較虛弱或是無法適應高糖飲食環境而死掉,但我們做了很多次實驗,以減少實驗上的誤差。
3. 選擇果蠅作為實驗對象的原因為何?
先前實驗已證明果蠅是無脊椎動物中代謝機制較接近人類的,因此我們選用果蠅來進行實驗。至於不選擇老鼠做為實驗對象,是因為我們的一個實驗是探討藥物對生命週期長短的影響,老鼠的壽命為3~4年,果蠅為約2~3個月,而且只要約14天就可以產生大量的子代果蠅,基於時間的緊迫,我們選擇了果蠅。
4. 是否有實驗證實攝食普通飲食及高糖飲食的壽命差異?
我們在進行高糖食物實驗前,其實有進行普通飲食的實驗,因為礙於版面和時間的關係,沒有放在簡報上。兩實驗相較至下可以發現果蠅生命週期在高糖飲食下大幅縮短,從原本的70幾天縮減成40幾天。
5. 為什麼RV不能rescue高糖攝取的雄果蠅?
目前我們只得到了這項結果的呈現,但是詳細原因我們還需近一步研究。
6. 如果在正常飲食加入RV,還會有性別差異嗎?
有。正常飲食下,雌果蠅的存活率下降仍較緩慢,而雄果蠅則在一定天數後存活率大幅下降。其趨勢與高糖食物下的折線圖大致相等,但生命週期長短明顯較高糖環境為長。
7. RV如何增長果蠅的lifespan?
因為RV的相關研究起步較晚,所以目前有許多相關機制仍屬未知。目前有實驗指出,RV可能可以活化與循環代謝相關的基因。此有可能是其延長果蠅壽命的關係。
8. 測定磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的原因?
有研究指出,在細胞代謝醣類的反應機制中細胞藉著AMPK的活化減少內臟脂肪及膽固醇的合成,並且抑制肝臟糖質新生,因此AMPK已被廣泛的認為是治療第二型糖尿病的分子標耙。我們也藉由測定磷酸化與非磷酸化蛋白,試圖了解藥物對於果蠅體內醣類代謝情形進行了解。
9. 如何判定攀爬能力?有沒有可能果蠅只是不想爬?是否考慮飛行和爬上爬下?如何讓果蠅非爬不可,不然測到的可能是飲食如何影響果蠅攀爬”意願”而非”能力”?(此為很多個相似問題的總結)
因為果蠅本身具有背地性,在活動能力足夠時果蠅會趨向往上爬,留在底部的只是少數,再來因為管子容積不大,果蠅在管子中較不會選擇用飛的(不然容易撞牆),而且我們在前人的實驗中有看到類似的實驗,因此我們選擇用攀爬能力做探討。我們做相同的實驗做了很多次,蒐集夠多的樣本數,減少少數不想爬或掉下來果蠅所造成的誤差。