07/06/2022
A técnica de GRAM é um método laboratorial usado para separação das bactérias (aquelas que têm uma parede celular típica) em dois grupos, gram positiva e negativa. Sendo particularmente diferenciadas de acordo a sua propriedade tintorial, observando-se na microscopia óptica uma coloração violeta ou azul por parte das bactérias gram positiva e uma coloração vermelha ou rosada por parte das bactérias gram negativa.
ATT: não é um exame específico para determinação da bactéria causadora da infecção (porque existe muitas bactérias gram positiva e negativa), mas o auxílio do antibiograma poderá ajudar num diagnóstico específico combatendo especificamente a bactéria causadora da infecção.
As bactérias gram positiva apresentam uma única bi-camada lipídica, uma camada com muitos peptidoglicanos (representando cerca de 90%).... já as bactérias gram negativa apresentarão dupla bi-camada lipídica, uma camada com poucos peptidoglicanos (representando cerca de 10%), uma proteína (porina) interligando a segunda bi-camada lipídica e uma semi-camada de lipopolissacaridos.
1º Cristal violeta
2º Iodo
3º Álcool metílico
4º Safranina
Obs: no momento da coloração usa-se essa sequência para a utilização dos corantes.
Após cobrirmos a nossa amostra com o primeiro corante, Cristal violeta, teremos todos os elementos celulares corados em azul ou violeta, incluindo as bactérias gram positiva e negativa. Seguindo com a técnica adicionaremos o segundo corante, Iodo, que vai reforçar a acção do cristal violeta na parede celular das bactérias gram positiva devido a alta sensibilidade apresentada pela exposição dos peptidoglicanos naquela bactéria. Posteriormente adicionaremos o álcool metílico para fixar as bactérias gram positiva e descorar as bactérias gram negativa (uma vez que as mesmas também se encontravam coradas pelo primeiro corante), deste modo teremos as bactérias gram positiva coradas em violeta e as gram negativa descorada pela acção do álcool metílico. E por fim, adicionaremos o último corante, Safranina, para corar as bactérias gram negativa que até ao momento não apresentavam uma coloração, as mesmas estarão coradas em rosa.
28/04/2022
28/04/2022